Wenn zur Herstellung medizinisch brauchbarer Proteine durch Transformation Bakterien verwendet werden, müssen die fraglichen Proteine von allen anderen zellulären Proteinen getrennt werden. In diesem Experiment dienen die einmaligen Fluoreszenzeigenschaften des GFP und des BFP als Test im Verlauf der Aufreinigung der aus einem E. coli-Extrakt. Die Säulenfraktionen, die GFP oder BFP enthalten, werden durch Fluoreszenz identifiziert und anschließend aufgereinigt. Im Rahmen einer optionalen Übung können die aufgereinigten Proteinfraktionen durch SDS-Polyacrylamidgel-Elektrophorese (SDS-PAGE) getrennt werden, damit sich Reinheit und Größe der GFP und BFP einschätzen lassen.
- Für 6 Laborgruppen
- Packen der Säule und Säulentrennung: 45 Minuten, optionale Elektrophorese: 60 Minuten, Färben: 30 Minuten, Entfärben: 2 Std.
Außerdem erforderlich: Wasserbad, Langwellen-UV-Lampe, Ringstativ und Klemmen, automatische Mikropipette, vertikale Gelelektrophoresekammer, Netzgerät, Polyacrylamidgele (12 %).
Lieferumfang: Im Kit enthalten: Anleitung, Säulen und Matrix, GFP- und BFP-Extrakte, Puffer, Proteingelreagenzien für optionale Übung.
